產品介紹
PAGE 凝膠快速制備試劑盒使用說明書
產品簡介
本產品現已配套提供改良型過硫酸銨催化劑溶液,提高了過硫酸銨溶液的穩定性和催化效能。請將此過硫酸銨溶液保存于-20℃。為方便吸取使用,已開蓋使用中的過硫酸銨溶液可置于 4℃保存。
使用本產品凝膠制備試劑無需加入有極臭異味且有毒的 TEMED 試劑,只需加入過硫酸銨即可凝膠,使研究人員可避免因操作 TEMED 而帶來的不快和對健康的影響。配制一塊或多塊凝膠最少只需 2 分鐘的動手操作時間。特有顏色配方的濃縮膠,使點樣孔清晰易辨,方便點樣。多種顏色設計,更能輕易區分含不同樣品的凝膠。所含顏色配方不影響電泳,染色及轉膜等后續應用。本試劑盒灌制的凝膠也可用于非變性 PAGE 凝膠電泳。
注意:本產品常溫運輸,保存于 2-8℃,保質期 12 個月。彩色預混濃縮膠緩沖液在儲存過程中可能產生少量沉淀,屬于正?,F象,請放心使用。
◆貨號規格
PG110: 可制備 125 個 6%的 mini 膠(0.75 mm)
PG111: 可制備 125 個 7.5%的 mini 膠(0.75 mm);
PG112: 可制備 125 個 10%的 mini 膠(0.75 mm);
PG113: 可制備 125 個 12.5%的 mini 膠(0.75 mm);
PG114: 可制備 125 個 15%的 mini 膠(0.75 mm);
◆產品內容
分離膠緩沖液(2×)250ml
分離膠溶液(2×)250ml
彩色濃縮膠緩沖液(2×)80ml
濃縮膠溶液(2×)80ml
改良型過硫酸銨溶液 8 ml
◆產品特點
1.快速制備凝膠——最少只需 2 分鐘的動手操作時間即可灌制多塊凝膠,無需計算所需溶液量,無需稀釋。
2.彩色濃縮膠——可制備紅黃綠三種顏色的濃縮膠,為點樣和區分不同凝膠提供最大便利。
3.避免操作有毒及異味的試劑——無需使用 TEMED,避免惡臭氣味。
制膠流程(以一塊 0.75/ 1.0/ 1.5 mm 的 mini 膠為例)
1. 取等體積分離膠緩沖液和分離膠溶液混勻,即取兩種溶液各 2.0/ 2.7/ 4.0 ml。
2. 往步驟 1 中的混合溶液中加入 40/ 60/ 80μl 的改良型過硫酸銨溶液,混勻。
3. 將步驟 2 中的溶液注入制膠玻璃板中,加入適量水或醇(如乙醇、正丁醇等)覆蓋于分離膠之上。
4. 待分離膠凝固后,倒去上層水或醇。
5. 取等體積濃縮膠緩沖液和濃縮膠溶液混勻,即取兩種溶液各 0.5/ 0.75/ 1.0 ml,加入10/ 15/ 20μl 的改良型過硫酸銨溶液,混勻。
6. 注入制膠玻璃板中,插入梳齒。
7. 待濃縮膠凝固后,拔去梳齒即可用于電泳。
◆Tips:
1. 改良型過硫酸銨溶液的使用量僅作參考,實際用量可根據個人實驗習慣和經驗增加或減少。加入較多量的過硫酸銨可加快凝膠速度,反之亦然。
2. 本產品已加入適量 TEMED 的替代品,如需進一步加快凝膠速度,臨配膠前可按需補充適量 TEMED。
3. 凝膠過程中產生氣泡的原因:空氣在溶液中的溶解度隨著溫度的升高而降低;低溫儲存的溶液溶解較多的空氣;凝膠的凝聚是一個放熱反應,同時低溫溶液在室溫環境下緩慢吸熱。兩者共同促成凝膠溫度的升高,使得其溶解的空氣因溶解度降低而釋放出來,形成氣泡。因此,在將凝膠溶液灌制到玻璃板中之前,使之平衡到室溫(如放置幾分鐘),可有效避免凝膠中氣泡的形成。
4. 盡管整個凝固反應是一個放熱反應,但是這是一個多步驟的反應,最初反應的觸發仍然需要較多的熱能。實踐證明,膠的凝固與溫度有顯著的正相關性。同等條件下,溫度越高,凝固速度越快。如 25℃時的凝固速度要顯著快于 15℃時的凝固速度。同理,在 37℃ 時,凝固速度會進一步加快。